RP-HPLC测定正常人血清中的瓜氨酸

作者：吴怡; 孔灿; 马晓; 杨天巧; 叶盟; 陈梦馨; 吴娜; 邓菊庆^*

来源：华西药学杂志, 2020, 35(06): 630-634.

DOI：10.13375/j.cnki.wcjps.2020.06.010

• 瓜氨酸
• 人血清
• 含量测定
• 高效液相色谱
• 柱前衍生化
• 2,4-二硝基氟苯

目的采用反向HPLC法测定人血清中的瓜氨酸含量。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,柱前衍生;采用Amethyst C18-H色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为乙腈-水溶液(1:1),流动相B为50 mmol·L-1磷酸二氢钾加1‰磷酸的缓冲盐溶液,梯度洗脱,检测波长360 nm,柱温30℃,流速1 mL·min-1。结果在该实验条件下,瓜氨酸在30 min内的分离度良好,0.25～100μg·mL-1瓜氨酸与峰面积呈良好的线性关系,精密度的RSD=1.98%,供试样品48 h内稳定,重复性的RSD=1.55%,平均加样回收率为87.45%,RSD=1.47%;在此方法基础上测定正常人血清中瓜氨酸的含量为33.08±6.46μmol·L-1。结论所用方法稳定可靠、高效简洁、灵敏度高、成本低。

• 单位
  基础医学院; 昆明医科大学