蔬菜菌核病两种病原菌双重PCR检测方法的建立

作者：徐丽慧; 商庆华; 曾蓉; 高士刚; 高萍; 宋志伟; 张敬泽^*; 戴富明^*

来源：植物病理学报, 2023, 53(06): 1200-1207.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.001613

• 蔬菜菌核病
• 核盘菌
• 小核盘菌
• 双重PCR

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和小核盘菌(Sclerotinia minor)是引起蔬菜菌核病的两种主要病原菌。为了建立针对这两种病原菌的快速分子检测体系，本研究基于漆酶2编码基因(laccase 2)分别设计了针对S.sclerotiorum和S.minor的特异性引物对Sslcc2-F/R和Smlcc2-F/R,在此基础上建立了双重PCR检测体系。通过对该体系的灵敏度以及蔬菜菌核病模拟侵染样品进行检测，证实了双重PCR技术的可行性。研究结果表明：能通过扩增片段的大小区分S.sclerotiorum和S.minor,引物Sslcc2-F/R可扩增出大小为410 bp的S.sclerotiorum特异性条带，其检测灵敏度可达3.11×10-2 ng·μL-1;引物Smlcc2-F/R可扩增出大小为609 bp的S.minor特异性条带，其检测灵敏度为3.42×10-2 ng·μL-1。在混合两对引物的体系中，检测灵敏度为3.0×10-1 ng·μL-1。本研究建立的双重PCR体系能同时对引起蔬菜菌核病的两种主要病原菌进行准确、快速和灵敏的检测。

• 单位
  浙江大学; 上海市农业科学院