雌激素受体介导的柚皮苷抗Aβ25-35损伤PC12细胞凋亡作用研究

作者:王媛; 武凤; 熊辉; 徐艳明; 雷霞; 徐红丹; 孙慧峰; 张宁; 杨波*
来源:辽宁中医药大学学报, 2023, 25(02): 63-67.
DOI:10.13194/j.issn.1673-842x.2023.02.014

摘要

目的 探讨雌激素受体介导的柚皮苷(NG)抗β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的凋亡作用及其与雌激素受体(ER)信号通路的关系。方法 实验分为空白组、Aβ25-35组、E2+Aβ25-35组、NG+Aβ25-35组、ICI182780+E2+Aβ25-35组、ICI182780+NG+Aβ25-35组。实验采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(WB)检测细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;RT-qPCR法检测细胞凋亡因子mRNA的表达。结果 Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术结果显示,与空白组相比,Aβ25-35组细胞凋亡率升高(P<0.01);与Aβ25-35组相比,NG+Aβ25-35组细胞凋亡率降低(P<0.01);与NG+Aβ25-35组相比,ICI182780+NG+Aβ25-35组细胞凋亡率升高(P<0.01)。WB结果显示,与空白组相比,Aβ25-35组细胞Bax和Caspase-3蛋白表达量升高(P<0.01),Bcl-2则相反(P<0.01);与Aβ25-35组相比,E2+Aβ25-35组Bax和Caspase-3蛋白表达量降低(P<0.01),Bcl-2则相反(P<0.01);雌激素受体介导的NG的作用与E2相似,而ICI182780逆转了NG的作用。RT-qPCR结果显示,NG对细胞Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响与蛋白结果一致。说明NG是通过激活ER信号通路发挥抗凋亡作用,作用与E2一致。结论 雌激素受体介导的NG有明显的抗凋亡作用,通过提高Bcl-2的正常表达,降低Bax和Caspase-3的正常表达发挥抗凋亡作用,其抗凋亡作用可能经ER介导。