摘要
为优化大花金挖耳细胞培养物总黄酮提取条件并初步测试细胞培养物抑菌活性。本文在考察不同干燥方式、溶剂、粉碎度和固液比等单因素对培养物总黄酮提取效果的基础上,采用L9(34)正交试验优化了振荡提取时间、超声波功率、超声波处理时间对培养物总黄酮提取工艺,并采用菌丝生长速率法测定了细胞培养物抑菌活性。结果表明,大花金挖耳培养细胞的黄酮含量显著高于培养液;室温下以丙酮为最佳提取溶剂;烘干和冷冻干燥对大花金挖耳胞内总黄酮的得率没有显著差异;样品粒度40~60目,固液比1:10~1:15(g/mL),超声提取(功率600 W、60min)1次后,再摇床振荡提取(18 h)1次,胞内黄酮的得率达1.22%,该方法简单,耗时短。抑菌试验表明,大花金挖耳悬浮培养细胞的乙醇粗提物对供试8种病原菌有不同程度的抑菌作用,在药液浓度50 mg/mL时,抑制率达到50%以上的供试病原菌有辣椒疫霉、苹果炭疽和小麦纹枯等3种病原菌。本研究为大花金挖耳细胞培养抑菌活性物质的提取工艺提供了参考。
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