摘要
来自绿色气球菌的丙酮酸氧化酶被广泛用于食品工业、医药工业及生物检测等方面,但其多聚体结构会导致酶稳定性低,因此提高丙酮酸氧化酶的稳定性有助于丙酮酸氧化酶的推广和应用。首先筛选了醇类、糖类和离子稳定剂,进而优化了稳定剂复配组成。结果表明:在4℃、pH 6.0的条件下,含有0.01 mmol/L CuSO4、30 g/L甘油和90 g/L PEG2000的复合稳定剂能够将丙酮酸氧化酶活性提升为对照组的1.5倍。丙酮酸氧化酶稳定性的提高归因于丙酮酸氧化酶亚基之间连接的强化,它们之间形成了更多有活性的四聚体。最后,添加复合稳定剂的丙酮酸氧化酶在-20℃下储存28 d后仍能保持46.7%的酶活。可见,复合稳定剂能显著提高丙酮酸氧化酶的稳定性,有利于丙酮酸氧化酶的更广泛应用。
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