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摘要
目的对影响沉香随机扩增多态性DNA(RAPD)反应的各因素进行优化,建立适用于沉香RAPD的最佳反应体系。方法采用改良的CTAB法提取基因组DNA,变化单一因素的方法对模板DNA浓度、Taq酶用量、dNTPs、引物浓度、Mg2+浓度、退火温度对RAPD影响进行分析。结果建立了适合沉香RAPD分析的最佳反应体系:在20μl反应体系中,模板DNA用量20 ng、Taq酶1.0 U、dNTPs浓度为0.3~0.4 mmol.L-1、随机引物浓度为0.6μmol.L-1、Mg2+浓度1.5~2.0mmol.L-1。PCR反应条件:94℃,10 min;94℃,1 min;36℃,1 min;72℃,2...
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