叉头框家族蛋白A1在膀胱癌组织的表达及其对膀胱癌细胞生物学行为的影响

作者：杨小明^*; 方志伟; 魏晓松; 杨阳; 易成智

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(12).

• 叉头框家族蛋白A1
• 膀胱癌
• 生物学行为
• 机制

目的检测翼状螺旋转录因子叉头框家族蛋白(FOX) A1在膀胱癌组织及细胞中的表达水平, 探讨FOXA1对膀胱癌细胞生物学功能的影响及机制。方法收集郑州大学第一附属医院2016年1月1日至2020年1月1日膀胱癌根治术石蜡病理92例, 癌旁组织79例, 采用免疫组织化学检测膀胱癌患者及正常膀胱上皮组织中FOXA1蛋白的表达水平, 并分析FOXA1表达与患者临床病理特征的关系。在膀胱癌细胞系5637中转染小干扰RNA(siRNA)-FOXA1, 将细胞分为对照组(shctrl)及转染组(shFOXA1)采用蛋白质印迹法(Western blot)验证转染效率。采用荧光细胞增殖实验检测细胞增殖能力, 采用Matrigel检测细胞侵袭能力。采用Western blot检测snail、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平, 两组间比较采用t检验。结果免疫组化显示FOXA1在膀胱癌中表达水平显著低于正常膀胱上皮组织[0.45(41/92)比0.63(50/79), χ2=5.986, P<0.05], 高级别尿路上皮癌、Ⅲ+Ⅳ期、T3+T4膀胱癌组织中FOXA1表达水平更低, 差异有统计学意义[0.43(21/49)比0.70(30/43), 0.39(13/33)比0.64(38/59), 0.29(6/21)比0.63(45/71), χ2=6.713、5.360、7.949, P<0.05], shFOXA1转染5637细胞系成功后, 对照组在3、5 d时细胞增殖数目低于转染组[5637细胞系shctrl比shFOXA1-1为, 3 d:(157.67±1.53)个比(420.00±21.52)个;5 d:(421.00±23.00)个比(1 387.01±32.36)个, t=21.061、39.652, P<0.01;shctrl比shFOXA1-2为, 3 d:(157.67±1.53)个比(407.00±16.37)个;5 d:(421.00±23.00)个比(1 493.00±40.73)个, t=26.673、30.132, P<0.05]。Matrigel实验中对照组侵袭细胞数目低于转染组[5637细胞系shctrl比shFOXA1-1为(151.62±13.77)个比(343.14±20.44)个, t=21.551, P<0.05;shctrl比shFOXA1-2为(151.62±13.77)个比(407.50±22.50)个, t=26.422, P<0.05]。Western blot实验显示FOXA1下调组snail、Vimentin表达显著高于对照组(snail:5.24±0.94比1.00±0.09, t=7.831, P<0.05;Vimentin:5.88±0.48比1.00±0.10, t=17.141, P<0.05), FOXA1下调组E-cadherin表达水平显著低于对照组(0.18±0.03比1.00±0.06, t=22.445, P<0.05)。结论 FOXA1在膀胱癌组织中异常低表达, 可作为抑癌基因在膀胱腺癌发生发展发挥重要作用。

• 单位
  郑州大学第一附属医院