低氧和低氧诱导因子在月经样小鼠模型中对子宫内膜崩解的作用

作者：梁敏; 陈西华; 王树芳; 张欣; 鲁聪; 武斌; 南楠; 张博男; 贺斌; 徐祥波^*

来源：生殖医学杂志, 2021, 30(06): 772-779.

• 低氧诱导因子
• 低氧
• 子宫内膜
• 月经发生
• 小鼠月经样模型

目的探究低氧和低氧诱导因子(HIF1A)在小鼠子宫内膜崩解过程中的表达及作用。方法构建药理性小鼠月经样模型。根据月经样小鼠给药处理方式不同分为4组:(1)PW-CoCl-2组(n=5):孕酮(P4)维持,不添加二氯化钴(CoCl2);(2) PW-CoCl+2组(n=6):P4维持,CoCl2给药;(3) PW+CoCl-2组(n=5):P4撤退,不添加CoCl2;(4) PW+CoCl+2组(n=6):P4撤退,CoCl2给药。P4撤退后0 h、8 h、12 h、16 h、24 h处死小鼠并收集子宫组织,通过低氧探针和免疫组化检测P4撤退后不同时间点小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;P4撤退后24 h,观察各组小鼠的子宫大体,HE染色法观察各组小鼠子宫组织形态,免疫组化染色法观察PW+CoCl-2组和PW+CoCl+2组小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测P4撤退后24 h子宫组织细胞质和细胞核中HIF1A的表达情况。结果免疫组化染色显示,小鼠子宫组织在P4撤退后低氧持续时间为0～24 h, P4撤退12 h和16 h时小鼠子宫低氧探针染色面积占比和HIF1A表达水平均显著高于P4撤退0 h时(P<0.05),低氧探针和HIF1A表达位置有很强的相关性。子宫大体和组织形态学观察显示,P4撤退后24 h, PW- CoCl-2组和PW- CoCl+2组小鼠子宫内膜保持完整,PW+ CoCl-2组和PW+ CoCl+2组子宫崩解出血。免疫组化染色结果显示,PW+ CoCl+2组子宫内膜的低氧染色面积占比和HIF1A核染色细胞百分比均显著高于PW+ CoCl-2组(P<0.05)。Western blot结果显示,P4撤退后24 h, PW- CoCl-2组子宫组织细胞质HIF1A表达较高,在细胞核中几乎检测不到;与PW- CoCl-2组相比,PW- CoCl+2组细胞质HIF1A的表达显著降低而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW+ CoCl-2组细胞质HIF1A的表达无显著变化而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW+ CoCl+2组细胞质、细胞核HIF1A的表达均显著升高(P<0.05)。结论月经期间P4撤退导致子宫内膜崩解。低氧和HIF1A与月经期间子宫内膜崩解有关,但不是必需因素。

• 单位
  济南市中心医院; 新乡医学院; 山东大学; 北京协和医学院