LC-MS/MS法测定E.coli胞内24种代谢物

作者：梅辉; 戴军; 刘文卫; 宋鹏飞; 吴敬; 赵志军

来源：食品与发酵工业, 2011, 37(05): 151-156.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2011.05.004

• 高效液相色谱-串联质谱
• 大肠杆菌
• 胞内中间代谢产物
• 代谢组学

建立了一种快速、准确的同时测定大肠杆菌(E.coli)24种胞内代谢中间产物的液相色谱-串联质谱分析方法。样品经过淬灭、洗涤和提取后得到胞内代谢物,高速冷冻离心去除杂质。经Waters Atlantis HILIC silica色谱柱分离,以乙腈-10 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为250μL/min。电喷雾负离子(ESI-)模式电离,多反映监测模式(MRM)检测,基质标准溶液法进行定量。结果表明:24种代谢物在0.10～100μmol/L范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99;24种代谢物的检出限(S/N>3)为0.05～0.34μmol/L,3个添加水平的回收率为83.7%～108.1%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。该方法具有简便、灵敏度高、定性准确等特点。

• 单位
  江南大学; 食品科学与技术国家重点实验室