微小RNA-486靶向TRIM10抑制帕金森病细胞模型损伤

作者：廖建云^*; 江新柳; 谢为法

来源：解剖学报, 2022, 53(04): 424-431.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2022.04.004

• 微小RNA-486
• TRIM10
• 帕金森病
• 免疫印迹法
• PC12细胞

目的 探讨微小RNA(miR)-486对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的体外帕金森病(PD)PC12细胞模型凋亡的影响和机制。方法 实验分成对照(control)组、PD组(MPP+诱导PC12细胞)、miR-NC组[MPP+诱导PC12细胞转染模拟(mimics)对照(mimics control)]、miR-486组(MPP+诱导PC12细胞转染miR-486 mimics)、miR-486+载体(vector)组(共转染miR-486 mimics和pcDNA3.1)、miR-486+TRIM10组(共转染miR-486 mimics和pcDNA3.1-TRIM10),每组n=9。CCK-8法分析细胞增殖变化，流式细胞术分析细胞凋亡水平变化，Western blotting分析Bax和Bcl-2蛋白表达变化，硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量，荧光探针法检测细胞中活性氧簇(ROS)水平，二硝基苯肼分析培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)水平。用生物信息学软件预测miR-486的靶基因，双荧光素酶报告基因实验检测miR-486、TRIM10靶向关系。结果 与control组比较，PD组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达降低，细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平升高。与miR-NC组比，miR-486组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达升高，细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平降低。MiR-486靶向下调TRIM10表达。与miR-486+vector组比较，miR-486+TRIM10组细胞存活率、Bcl-2蛋白水平降低，细胞凋亡率、Bax蛋白水平、MDA、ROS和LDH水平升高。结论 上调miR-486可通过靶向抑制TRIM10减少MPP+诱导的体外帕金森病PC12细胞模型的凋亡。

• 单位
  神经内科; 景德镇市第二人民医院