口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达

作者：魏衍全; 田宏; 吴锦艳; 陈妍; 尚佑军; 窦永喜; 刘湘涛; 才学鹏

来源：中国兽医科学, 2011, (05): 479-483.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2011.05.006

• 口蹄疫病毒
• 3C基因
• 增强型绿色荧光蛋白
• 真核共表达 foot-and-mouth disease virus
• 3C gene
• enhanced green fluorescent protein(EGFP)
• eukar-yotic co-expression

为验证siRNAs对口蹄疫病毒(FMDV)复制的抑制效果,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Asia 1型口蹄疫病毒Jiangsu/China/2005株的3C基因,克隆入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-N1中,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染PK-15细胞,检测EGFP的表达和3C基因转录水平。结果显示,经PCR及双酶切鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与Jiangsu/China/2005株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内有EGFP表达,实时荧光定量PCR检测到细胞内有3C基因的转录。证实,成功构建了FMDV 3C基因与E...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所