MCT2激活Nrf2通路调控H/R视网膜神经节细胞凋亡与焦亡

作者：张小敏; 刘文; 蔡傲竹

来源：河北医学, 2022, 28(09): 1425-1431.

• 单羧酸转运蛋白2
• 视网膜神经节细胞
• 细胞凋亡
• 细胞焦亡
• 核因子E2相关因子

目的:探究单羧酸转运蛋白2(monocarboxylate transporters 2,MCT2)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)后视网膜神经节细胞凋亡与焦亡的影响及机制。方法:将视网膜神经节细胞RGC-5随机分为对照组、H/R组、MCT2组、MCT2+ML385组，通过脂质体将pcDNA3.1-MCT2重组质粒转染至RGC-5细胞，建立细胞H/R模型，并用Nrf2抑制剂ML385处理细胞;细胞进行对应处理后，实时荧光定量PCR和蛋白质印迹(Western blot)法检测转染效率，CCK-8法测定细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡水平，Hoechst/PI染色法检测PI凋亡指数，Western blot法检测细胞内凋亡相关蛋白与焦亡相关蛋白的表达水平，免疫荧光染色观察细胞内核因子E2相关因子(Nrf2)与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)表达。结果:将pcDNA3.1-MCT2转染至RGC-5细胞后，细胞内MCT2 mRNA与蛋白相对表达量均显著上调(P<0.05);经H/R处理后，细胞增殖活性下降，细胞凋亡率增加，PI凋亡指数升高，细胞内Bax和Caspase-3蛋白相对表达量均上调而Bcl-2蛋白相对表达量下调，GSDMD、Caspase-1、NLRP3及IL-1β蛋白相对表达量均上调，Nrf2荧光强度减弱，Caspase-1荧光强度增强，差异均有统计学意义(P<0.05);细胞转染pcDNA3.1-MCT2再经H/R处理后，细胞增殖活性升高，细胞凋亡率减少，PI凋亡指数降低，细胞内Bax和Caspase-3蛋白相对表达量均下调，Bcl-2蛋白相对表达量上调，同时，细胞内GSDMD、Caspase-1、NLRP3及IL-1β蛋白相对表达量均下调，Nrf2荧光强度增强，Caspase-1荧光强度则减弱，差异均有统计学意义(P<0.05);而细胞经转染pcDNA3.1-MCT2与H/R处理后再用Nrf2抑制剂ML385作用，细胞增殖活性下降，细胞凋亡率与PI凋亡指数升高，细胞内Bax和Caspase-3蛋白相对表达量均上调、Bcl-2蛋白相对表达量下调，GSDMD、Caspase-1、NLRP3及IL-1β蛋白相对表达量均上调，Nrf2荧光强度减弱，Caspase-1荧光强度增强，差异均有统计学意义(P <0.05)。结论:MCT2能够抑制H/R诱导的视网膜神经节细胞的凋亡与焦亡，该作用机制可能与激活Nrf2途径相关。

• 单位
  武汉大学中南医院