桃酵母双杂交cDNA文库的构建及生长素响应因子4互作蛋白的筛选

作者：郭振华; 要宏阳; 杨海清; 王青; 刁冬慧; 刘悦萍^*

来源：北京农学院学报, 2022, 37(01): 11-16.

DOI：10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2022.0102

• 桃
• 果实成熟
• 酵母双杂交cDNA文库
• 生长素响应因子4
• 酵母双杂交

【目的】为解析桃果实发育成熟的机制,通过构建成熟期前后桃果实的酵母双杂交cDNA文库,筛选生长素响应因子4的互作蛋白,探究生长素响应因子4对桃果实成熟过程的调控作用。【方法】以硬溶质桃(Prunus persica L.)‘突围’为材料,提取果皮的总RNA,建立酵母双杂交cDNA文库,采用Mating法筛选生长素响应因子4的互作蛋白。【结果】构建的酵母双杂交cDNA文库的总库容量1.6×107CFU,重组率100%,插入片段平均长度大于1 000 bp。构建诱饵载体pGADT7-PpARF4重组质粒,在桃果实酵母双杂交cDNA文库中筛选互作的靶蛋白,共获得有潜在互作的蛋白26个,主要功能涉及信号转导与胁迫响应、器官的形成、大分子代谢及蛋白合成与修饰因子。【结论】试验建立的酵母双杂交cDNA文库质量较高,完整性较好,为后续筛选果实成熟相关蛋白奠定基础。

• 单位
  北京农学院