重组甘精胰岛素的可溶性表达研究

作者：甘子仪; 华子春

来源：东南大学学报(医学版), 2013, (06): 663-669.

DOI：10.3969/j.issn.1671-6264.2013.06.002

• 甘精胰岛素
• 多分子伴侣
• 共表达 insulin glargine
• molecular chaperones
• co-expression

目的:构建甘精胰岛素(ING)表达载体,提高ING在大肠杆菌中的可溶性表达。方法:在传统方法中ING的A、B链之间用C肽连接,本实验在ING的A、B链之间插入大肠杆菌硫氧还蛋白质(Trx)来替代C肽,进行ING的融合表达(ING-Trx),并进一步使用多分子伴侣GroEL、GroES、触发因子进行共表达。结果:可溶性的ING-Trx融合蛋白约占该目的蛋白质总表达量的35%;多分子伴侣共表达后可溶性ING-Trx的产量提高到ING-Trx总蛋白的78%,初步纯化后其产量为4.5 mg·L-1,是使用分子伴侣前的3倍。结论:用Trx代替C肽不影响A、B链的有效折叠,采用分子伴侣共表达可以显著提高目...

• 单位
  南京大学; 医药生物技术国家重点实验室