APP695-siRNA慢病毒载体构建及其对SH-SY5Y细胞中APP695基因的沉默作用

作者：温丽君; 滕军放; 赵莘瑜; 崔月梅; 巴庆华; 张爱玲

来源：郑州大学学报(医学版), 2011, (04): 520-523.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2011.04.011

• siRNA
• 慢病毒载体
• APP695基因 siRNA
• lentivirial vector
• APP695 gene

目的:构建针对APP695的siRNA慢病毒载体,并检测其对人神经纤维母细胞瘤SH-SY5Y细胞株中APP695基因表达的沉默作用。方法:设计并合成针对筛选确定的APP695基因寡核苷酸序列特异性siRNA有效靶序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列,将以上寡核苷酸序列退火后连入pFU-GW-iRNA质粒,酶切和测序鉴定后,将它们分别与包装质粒混合物共感染293T细胞,产生具有感染能力的慢病毒颗粒,并感染SH-SY5Y细胞,分未经病毒感染(CON)组、阴性对照病毒感染(NC)组和慢病毒介导阳性干扰(APP695-RNAi)组;应用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)检测各组细胞APP695...

• 单位
  郑州人民医院; 郑州大学第一附属医院