SARS病毒BJ01株核壳蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

作者:陈水平; 刘素辉; 范宝昌; 赵慧; 姜涛; 秦成峰; 杨保安; 秦鄂德
来源:微生物学免疫学进展, 2005, 33(2): 32-35.
DOI:10.3969/j.issn.1005-5673.2005.02.008

摘要

通过RT-PCR从SARS病毒BJ01株的RNA中扩增全长N基因,经凝胶回收后插入pBAD/TOPO ThioFusion表达载体.然后在Top10中利用阿拉伯糖进行诱导表达,在优化的条件下,表达产物以可溶性为主,表达量约占细菌可溶性总蛋白的47%.表达产物采用ProBond蛋白纯化系统纯化后,目的蛋白约占67%.经免疫印迹法检测,表达产物与SARS病人恢复期血清和兔的抗血清均可进行特异反应.BJ01株核壳蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达为后续的ELISA试剂盒的研制奠定了基础.

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