氨来呫诺对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

作者：张勇; 关邯峰; 方忠; 吴巍; 熊伟; 李锋

来源：骨科, 2018, 9(03): 229-234.

• 氨来呫诺
• 骨髓间充质干细胞
• 成骨分化
• 骨质疏松

目的探讨氨来呫诺调控大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用,为其在抗骨质疏松治疗等方面的应用提供理论依据。方法体外分离、培养SD大鼠BMSCs。(1)通过CCK8法检测不同浓度氨来呫诺对BMSCs增殖的影响;(2)设置对照组和氨来呫诺(25μmol/L)处理组,利用成骨诱导培养基进行诱导,诱导后第10天进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测;诱导后第21天进行茜素红染色;(3)实时荧光定量PCR检测诱导后第3、7、14天成骨分化相关基因ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达水平。结果 (1)CCK8检测结果显示25μmol/L氨来呫诺对BMSCs增殖没有明显影响,50μmol/L氨来呫诺显著抑制BMSCs的增殖,故在后续实验中均采用25μmol/L氨来呫诺作为效应浓度。(2)干预后第10天,氨来呫诺处理组较对照组的ALP染色阳性面积明显增多;干预后第21天,氨来呫诺处理组较对照组的钙结节形成密集,钙结节数目明显增多。(3)干预后第7天,氨来呫诺处理组较对照组中ALP的表达显著提高;第14天时,氨来呫诺处理组较对照组中RUNX2、OPN的表达显著提高。结论氨来呫诺可能通过促进BMSCs成骨分化相关基因表达,进而促进BMSCs细胞中ALP的表达和钙结节形成,促进BMSCs成骨分化。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院