百脉根结瘤因子受体NFR5及其相互作用蛋白的研究

作者：陈春芬; 朱辉; 杨绮; 朱浩; 张忠明

来源：中国油料作物学报, 2007, (04): 372-376.

• 酵母双杂交
• NFR5
• 小G蛋白Rop6
• 百脉根 Yeast two-hybrid system
• Small G-protein Rop6
• Lotus japonicus

以豆科植物百脉根的mRNA为模板,利用RT-PCR方法,扩增到1.0kb结瘤因子受体5(nod factorreceptor NFR5)蛋白激酶结构域的DNA片段(nfr5-pk),并将该片段克隆到酵母双杂交BD载体pGBKT7上。通过酵母双杂交技术,筛选接种根瘤菌的百脉根AD-cDNA酵母双杂交文库,从文库中分离到与nfr5-pk相互作用的221个阳性克隆。从这些阳性克隆酵母中分离AD质粒经反复验证,对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析。通过NCBI数据库比对分析鉴定出小G蛋白Rop6等6个与NFR5-PK相互作用的不同蛋白,为进一步研究NFR5基因的功能和调控机制提供了材料。

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室