1株牦牛源A型产气荚膜梭菌的生长特性及致病性研究

作者:黄家旗; 吴丹; 罗润波; 李宇鹏; 李彬; 石红梅; 参木友; 索朗斯珠*
来源:黑龙江畜牧兽医, 2023, (11): 79-139.
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2022.05.0063

摘要

为了了解青海牦牛源产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)的生长特性及致病性,并计算其对感染小鼠的半数致死量(LD50),以及观察感染小鼠各器官组织的损伤情况,试验复苏牦牛源产气荚膜梭菌ZD-01(CpA ZD-01)并配制种子液,采用振荡比浊法绘制CpA ZD-01菌株的生长曲线,并研究对数期菌液的OD600值与稀释倍数和细菌数量的关系;测定其外毒素粗提取液OD280值和OD260值,计算出不同培养时间毒素蛋白含量;给小鼠腹腔注射菌液,根据小鼠死亡情况确定LD0和LD100,并计算LD50,解剖小鼠观察牦牛源CpA ZD-01菌株对各组织器官的影响。结果表明:按照5%接种量接种菌株后,>2~10 h为对数期;菌液OD600值(y)与稀释倍数(x)的关系式为y=-0.607lnx+1.551,R2=0.990,P<0.05;菌液OD600值(y)与细菌数量(z)的关系式为y=4.679z-4.448,R2=0.995,P<0.05;在培养12 h后菌株所产生的毒素蛋白含量达到3.480 mg/mL,且第12小时为最佳产毒时间;菌株对感染小鼠的LD50为5.955×108 cfu/mL。急性死亡小鼠各器官无明显病理变化;慢性死亡小鼠脾脏白髓可见细胞增生,红髓淤血;大脑组织间质血管充血;肝细胞空泡变性;肾小管变性并伴有透明管型;肠道组织出现自溶现象。说明牦牛源CpA ZD-01菌株致病性较强。