茶树炭疽病病原菌的绿色荧光蛋白基因标记及其侵染研究

作者：李志伟; 谭玉梅; 任锡毅; 刘永翔; 黄永会; 刘作易^*

来源：基因组学与应用生物学, 2020, 39(08): 3510-3518.

DOI：10.13417/j.gab.039.003510

• 茶叶
• 胶孢炭疽菌
• 根癌农杆菌
• GFP标记
• 定殖

茶炭疽病是茶树上的叶部病害之一,在茶树上发生严重时会导致茶叶品质和质量的下降,造成一定的经济损失。本研究以根癌农杆菌GFP基因表达载体质粒EGFP-PSK2251和一株茶胶孢炭疽菌(GZCC20-0218)为材料,通过根癌农杆菌介导转化的方法,构建茶胶孢炭疽菌的遗传转化体系,筛选获得稳定遗传的转化子。利用荧光显微镜技术揭示转化子在叶片组织内定殖的特点。研究结果表明:根癌农杆菌与茶胶孢炭疽菌的分生孢子在26℃,0.2 mol/L乙酰丁香酮(AS)诱导下得到转化子。对转化子进行绿色荧光检测、分子验证及遗传稳定性测定后,从而获得稳定遗传的绿色荧光蛋白(GFP)标记菌株。同时,试验表明GFP标记菌株仍具有致病性。GFP标记菌株进行茶叶侵染试验时,7 d后茶叶发病率达到100%。发病叶片进行组织切片观察,发现胶孢炭疽菌的分生孢子可以在叶片的气孔和叶片组织内定殖。

• 单位
  贵州省农业科学院; 贵州大学