松萝酸调节RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路对脑梗死大鼠神经元坏死性凋亡的影响

作者：史可心; 宋征宇; 刘传芬; 胡瑾

来源：中药新药与临床药理, 2023, 34(12): 1678-1684.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2023.12.004

• 松萝酸
• RIPK1/RIPK3/MLKL
• 脑梗死
• 神经元
• 坏死性凋亡
• 大鼠

目的 探讨松萝酸对脑梗死大鼠神经元坏死性凋亡的影响，以及调节受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)/受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)/混合谱系激酶结构域样蛋白（MLKL）信号通路发挥的作用。方法 采用大脑中动脉阻塞再灌注（MCAO/R）方法建立大鼠脑梗死模型，将造模成功大鼠分为模型组、NEC-1(RIPK1抑制剂)组及低、中、高剂量松萝酸组，每组20只；另取20只大鼠设置为假手术组。药物干预3 d后，以改良大鼠神经功能损伤评分（m NSS）评价各组大鼠神经功能损伤程度；TTC染色检测脑梗死体积；HE染色观察脑组织病理损伤；PI/NeuN染色观察神经元坏死；RT-qPCR法检测大鼠缺血脑组织中RIPK1、RIPK3、MLKL的mRNA水平；Western Blot法检测大鼠缺血脑组织中RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路相关蛋白表达。结果 与假手术组比，模型组大鼠神经细胞结构破坏，细胞萎缩变形、核固缩；mNSS评分、脑梗死体积、PI阳性神经元比例均明显升高（P<0.05）；脑组织中RIPK1、RIPK3、MLKL mRNA水平，p-RIPK1/RIPK1比值及RIPK3、MLKL蛋白水平均明显升高（P<0.05）。与模型组比较，低、中、高剂量松萝酸组大鼠神经细胞形态受损程度逐渐减轻，核膜逐渐清晰，胞体逐渐恢复正常；NEC-1组大鼠神经细胞形态基本完好，核膜基本清晰；低、中、高剂量松萝酸组及NEC-1组mNSS评分、脑梗死体积、PI阳性神经元比例均明显降低（P<0.05），脑组织中RIPK1、RIPK3、MLKL mRNA水平及p-RIPK1/RIPK1比值和RIPK3、MLKL蛋白水平均明显降低，且松萝酸组呈剂量依赖性降低（P<0.05）；高剂量松萝酸组与NEC-1组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 松萝酸通过抑制RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路抑制脑梗死大鼠神经元坏死性凋亡，从而减轻脑梗死大鼠脑损伤。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院