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摘要
目的 NF-κB信号通路的激活在幽门螺杆菌相关性胃炎的发生发展中起到重要作用。文中旨在研究头花蓼在治疗HAG中NF-κB信号通路的作用,并观察其是否通过沉默信息调节因子1(SIRT1)调控NF-κB的乙酰化影响HAG的治疗效果。方法培养人永生化胃黏膜上皮细胞(GES-1),将H.pylori标准菌株ATCC700392按100∶1复制HAG细胞模型,随机分为模型组和头花蓼组,头花蓼组以80μg/m L的头花蓼进行处理,模型组以H.pylori与GES-1细胞共培养,未做任何处理的GES-1细胞设为对照组;Real time PCR检测SIRT1、NF-κB/p65和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA水平;Western blot检测总蛋白中SIRT1、NF-κB/p65及其乙酰化蛋白表达水平,细胞质、细胞核蛋白中SIRT1和NF-κB/p65的表达水平。结果 H.pylori感染GES-1细胞12 h后,培养上清液中TNF-α水平较对照组升高[(2.02±0.60)vs(1.02±0.42),P<0.05]。与对照组相比,模型组SIRT1表达含量下降[(1.637±0.085)vs(1.000±0.127),P<0.05],NF-κB/p65表达增加[(0.488±0.258)vs(1.000±0.044),P<0.05],TNF-αmRNA表达增加[(0.356±0.019)vs(1.011±0.019),P<0.05];头花蓼组SIRT1mRNA水平(3.474±0.349)上调,TNF-α表达(0.532±0.008)下调(P<0.05)。与模型组相比,头花蓼组SIRT1mRNA表达升高,NF-κB/p65及TNF-α表达下降(P<0.05)。与对照组比,模型组SIRT1蛋白表达水平下降,NF-κB/p65、Acetyl-NF-κB p65(Lys310)和TNF-α蛋白表达升高(P<0.05);头花蓼组SIRT1表达升高(P<0.05)。与模型组进行比较,头花蓼组SIRT1表达升高,而NF-κB/p65、AcetylNF-κB p6(Lys310)和TNF-α蛋白表达下降(P<0.05)。与对照组相比,模型组SIRT1在细胞质中表达下降(P<0.05),而在细胞核表达明显升高(P<0.05);头花蓼组SIRT1细胞质中表达下降,细胞核中表达明显升高(P<0.05),NF-κB/p65细胞质中表达上调(P<0.05)。与模型组相比,头花蓼组SIRT1在细胞质无明显变化,在细胞核明显表达上调(P<0.05);NF-κB/p65细胞质中表达升高,细胞核中则表达下调(P<0.05)。结论头花蓼能够活化胞核中的SIRT1,使胞核中活化的NF-κB/p65进行去乙酰化修饰来拮抗H.pylori诱导引发的细胞损伤。
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