牛病毒性腹泻病毒E2基因生物信息学分析及可溶性表达

作者：赵洪哲; 李新培; 范峻豪; 宋前进; 张静; 关平原; 温永俊^*

来源：中国动物传染病学报, 2020, 28(01): 63-67.

• 牛病毒性腹泻病毒
• 囊膜结构蛋白E2
• 原核表达

为了获得牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2基因的最佳可溶性蛋白,本试验根据GenBank已公布的BVDV E2基因序列,利用DNAStar等软件进行生物信息学分析,截取抗原性和亲水性较高的序列进行稀有密码子优化,串联信号肽序列后合成并连接到原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-Opti-E2;转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌,经SDS-PAGE和Western blot分析,成功获得大小为43 kDa的BVDV E2基因的最佳可溶性蛋白,且该蛋白特异性较好。本试验E2蛋白的成功表达可为后续ELISA方法的建立和亚单位疫苗的开发奠定基础。

• 单位
  内蒙古农业大学; 中国农业科学院特产研究所