γ-氨基丁酸A型受体β3亚基在2,3,7,8-四氯二苯并二英诱导胎鼠腭裂模型中表达的研究

作者：雷俊秋; 邱林^*; 丁雄辉; 傅跃先; 袁心刚; 刘燕

来源：中华口腔医学杂志, 2019, 54(05): 328-334.

• 腭裂
• 四氯二苯并二英
• γ-氨基丁酸A型受体β3亚基

目的利用2,3,7,8-四氯二苯并二英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin, TCDD)诱导C57BL/6J胎鼠腭裂, 检测γ-氨基丁酸A型受体β3亚基(gamma-aminobutyricacidtypeAreceptorbeta3subunit, GABRB3)在TCDD诱导胎鼠腭裂模型中的表达变化情况, 探讨腭裂的发生机制。方法将60只孕鼠按随机数字表法分为实验组和对照组, 每组30只。妊娠第10.5天(gestation day10.5, GD10.5)实验组以28 μg/kg的TCDD单次灌胃, 对照组以5.6 ml/kg玉米油单次灌胃。分别在GD13.5、GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5处死孕鼠12只, 每组处死6只。行胎鼠腭部形态学和组织学观察;应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测胎鼠腭部组织中GABRB3 mRNA及蛋白表达;免疫组织化学及免疫荧光染色检测GABRB3蛋白的表达部位。结果实验组共36只胎鼠, GD17.5腭裂的发生率为100%(36/36);对照组共47只胎鼠, 无腭裂发生(0/47)。实验组胎鼠腭突上抬在GD15.5完成, 较对照组腭突上抬延迟1 d;GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5实验组中GABRB3基因mRNA(分别为0.561±0.073、0.728±0.104、0.782±0.137、0.686±0.145)和蛋白表达(分别为0.288±0.013、0.404±0.017、0.399±0.012、0.307±0.010)均显著低于对照组GABRB3基因mRNA(分别为0.818±0.088、0.865±0.086、1.021±0.054、1.163±0.179)和蛋白表达(分别为0.481±0.017、0.456±0.009、0.474±0.016、0.529±0.015)(P<0.05);免疫组化及免疫荧光结果显示, GABRB3主要表达于腭突间质细胞和腭突中嵴上皮缝。结论 TCDD诱导胎鼠腭突上抬延迟并最终导致腭裂发生可能与GABRB3降低有关;GABRB3可能在腭部发育的上抬和融合期发挥重要作用。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院