牛疱疹病毒1型糖蛋白E(gE)可溶性表达及其反应原性分析

作者：杨晨; 孙续; 丁学智^*; 杨峰^*

来源：中兽医医药杂志, 2023, 42(03): 17-21.

DOI：10.13823/j.cnki.jtcvm.2023.067

• 牛传染性鼻气管炎
• 牛疱疹病毒1型
• gE蛋白
• 原核表达
• 载体构建

为探索牛传染性鼻气管炎诊断新技术，本研究以GenBank公布的牛疱疹病毒1型（BHV1,NC＿001847.1）基因序列为参考，预测并优化了BHV1的gE蛋白胞外区密码子序列。优化后的序列长度为1 275 bp,5’端和3’端分别添加限制性酶切位点SacⅠ和HindⅢ后克隆至载体pUC19，进而构建原核表达载体pET-SUMO-gE，将其转入大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中表达重组蛋白，使用NiNTA亲和柱纯化重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot检测结果证明，获得的牛疱疹病毒1型gE胞外区重组蛋白大小约为70 kDa，有良好的水溶性和反应原性。该研究结果为gE特异性单克隆抗体的制备及后续诊断试剂盒的研发奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所