酶标仪法测定发酵液中谷胱甘肽的含量

作者：张恩芬; 查飞; 周建宝; 费芙蓉; 王洲; 薛正莲^*

来源：滁州学院学报, 2019, 21(05): 31-34.

• 谷胱甘肽
• 测定
• 分光光度计
• 酶标仪
• 优化

对谷胱甘肽高通量选育技术而言,分光光度计法测定谷胱甘肽含量存在效率低、成本高等问题。该文在2-硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽含量的基础上,对谷胱甘肽2-硝基苯甲酸反应体系进行调整,对影响该反应的主要因素进行优化,并建立酶标仪快速检测方法。结果表明,谷胱甘肽的测定反应体系为0.25mol/L三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)0.6 mL,3%甲醛0.1 mL,0.1 mmol/L 2-硝基苯甲酸分析液1.5 mL时,谷胱甘肽样品量0.5 mL,并进行了精密度实验。最后,对诱变的45株突变株采用48孔板发酵后,对发酵液中谷胱甘肽的含量分别使用分光光度计和酶标仪在412nm下进行检测并将进行拟合度分析,验证该方法的可行性,计算酶标仪法和分光光度计法的相关系数R=0.9503,表明两种检测方法具有很好的一致性。因此,酶标仪法可以作为一种简便、高效、准确的方法运用于谷胱甘肽的快速测定,为高通量选育谷胱甘肽高产菌株提供了参考。

• 单位
  安徽工程大学