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摘要
目的 研究小檗碱干预缺血性脑卒中大鼠的相关作用机制。方法 选取85只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠，随机选取15只仅行假手术，设为健康组，其余70只建立缺血性脑卒中模型。将建模成功的62只大鼠随机分为缺血性脑卒中组(15只)、小檗碱低剂量组(15只)、小檗碱高剂量组(16只)、尼莫地平组(16只)。小檗碱低剂量组、高剂量组分别以100 mg/kg、200 mg/kg小檗碱灌胃，尼莫地平组以40 mg/kg尼莫地平灌胃，健康组、缺血性脑卒中组以等量生理盐水灌胃，每日1次，连续干预14 d。Morris水迷宫实验观察大鼠认知功能；TTC染色法测定脑梗死体积；羟胺法测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)水平、酶联免疫吸附法(ELISA)测定一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量；测磷法测定脑组织线粒体钙，镁-三磷酸腺苷(Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP)酶及Na~+,K~+-ATP酶活性；HE染色法观察脑皮质病理变化；TUNEL荧光染色法测定海马区神经元凋亡情况；蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定脑组织沉默信息调节因子2相关酶类1(SIRT1)、5-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK蛋白相对表达量。结果 缺血性脑卒中组神经元结构模糊，胞体肿胀，尼氏体消失，并出现软化灶、炎性细胞浸润，小檗碱干预后有所改善，尼莫地平组改善最为明显，其次为小檗碱高剂量组，最后为小檗碱低剂量组。与缺血性脑卒中组比较，小檗碱低剂量组、小檗碱高剂量组、尼莫地平组逃避潜伏期缩短，穿越原平台次数增加，目标象限停留时间延长，脑梗死体积减小，脑组织SOD含量增加，NO、eNOS含量减少，Na~+,K~+-ATP酶和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性增强，海马区神经元凋亡率降低，SIRT1蛋白相对表达量、p-AMPK/AMPK升高，差异均有统计学意义(P<0.05);与小檗碱低剂量组比较，小檗碱高剂量组、尼莫地平组逃避潜伏期缩短，穿越原平台次数增加，目标象限停留时间延长，脑梗死体积减小，脑组织SOD含量增加，NO、eNOS含量减少，Na~+,K~+-ATP酶和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性增强，海马区神经元凋亡率降低，SIRT1蛋白相对表达量、p-AMPK/AMPK升高，差异均有统计学意义(P<0.05);与小檗碱高剂量组比较，尼莫地平组逃避潜伏期缩短，穿越原平台次数增加，目标象限停留时间延长，脑梗死体积减小，脑组织SOD含量增加，NO、eNOS含量减少，Na~+,K~+-ATP酶和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性增强，海马区神经元凋亡率降低，SIRT1蛋白相对表达量、p-AMPK/AMPK升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 小檗碱可改善缺血性脑卒中大鼠认知功能、缩小梗死体积、减轻氧化应激及脑组织病理变化，改善脑组织能量代谢，减少海马神经元凋亡，推测其作用机制与激活AMPK信号通路有关。
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