摘要
【目的】近年来广亲和砧木类型小果甜柿已经在我国柿产业中广泛应用,但尚未建立起规模化无性系营养繁殖体系,尤其是离体培养的生根条件亟待优化,旨在建立小果甜柿组培快繁体系,并优化其生根条件。【方法】以小果甜柿为试材,重点探讨无菌离体培养过程中的生长调节剂种类、处理时间,以及暗处理等因素对其试管苗生根的影响。【结果】(1)休眠芽经75%乙醇消毒30 s,再使用1%次氯酸钠消毒6 min,消毒效果最佳,消毒后的休眠芽接种到含MS(Murashige&Skoog)(含1/2 NH4NO3和1/2 KNO3)+1 mg·L-1玉米素(zeatin,ZT)+0.1 mg·L-1吲哚乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)+30 mg·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂+0.6 g·L-1聚乙烯吡咯烷酮-40(polyvinylpyrrolidone-40,PVP-40)的初代培养基上,可获得62.56%的无根试管苗;(2)取初代培养试管苗侧芽接种于DKW+1 mg·L-1ZT+0.1 mg·L-1IAA+1000μmol·L-1甜菜碱+30 mg·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂+0.6 g·L-1PVP-40的培养基上,平均分蘖数1.59个,株高度3.30 cm,叶片数9.49片·株-1,茎节数7.40节·株-1,继代培养时可按照0.5 cm切取带芽茎段继续增殖培养,有效继代数目可达10.46个·代-1;(3)用100 mg·L-1萘乙酸(1-naphthaleneacetic acid,NAA)浸蘸生根处理茎段基部10 min,转入1/2 MS培养基,生根率90.00%,平均总根长度23.17 cm,平均根系表面积6.73 cm2,平均根系体积0.19 cm3;(4)茎段在1/2 MS+0.5 mg·L-1NAA+0.2 mg·L-1IBA+5 mg·L-1褪黑素(melatonin,MT)+30 mg·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂+0.6 g·L-1PVP-40的培养基中暗处理10 d后,再接种至无激素1/2 MS培养基上,生根率71.50%,平均总根长度24.14 cm,平均根系表面积9.74 cm2,平均根系体积0.27 cm3;(5)生根后的组培苗经闭瓶和开盖炼苗后移栽,成苗率52.5%,移栽至大田8个月后平均株高度49.17 cm,茎粗6.0 mm,可用于接穗的嫁接繁殖。【结论】构建的小果甜柿高效离体快速繁殖体系,为优质甜柿苗木的规模化营养繁殖提供了科学依据。
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单位山东省烟台市农业科学研究院; 华中农业大学