广州地区RhD变异型个体D抗原表位血型血清学特征及基因型分析

作者：黄伯泉; 贾双双; 温机智; 罗广平; 姬艳丽; 周华友

来源：中国输血杂志, 2021, 34(12): 1290-1295.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2021.12.004

• Rh血型系统
• RhD变异型
• RhD抗原表位
• 血清学
• 分子生物学
• 多重连接依赖的探针扩增(MLPA)

目的探讨广州地区RhD变异型个体D抗原表位特征及基因突变遗传分子机制。方法收集2019年1月～8月广州地区献血者及医院送检本中心做疑难RhD鉴定的RhD变异型标本59（人）份,用2种单克隆抗-D试剂及D-screen抗原表位检测试剂盒进一步分析D抗原表位的血清学特征,并做RhCE表型分型;采用QuickGene DNA提取试剂盒提取标本的基因组DNA,采用PCR-RFLP方法做RHD基因合子型分析;利用多重连接依赖探针扩增（MLPA）基因分型法做RHD基因型检测,并对仍存疑标本做RHD外显子（exon1～exon10）Sanger测序,使用DNAStar/SeqMan软件做综合分析。结果本组广州地区RhD变异型个体中,检出自献血者的占27.12%（16/59）[占同期广州中献血者比例0.007%（16/232 793）],医院送检的患者疑难标本占72.88%（43/59）。RHD基因型检测:40.68%（24/59）为RHD*weak partial 15、25.42%（15/59）为RHD*DⅥ.3以及33.90%（20/59）较少见的RhD变异型类型[其中合并2种不同等位基因的RhD变异型又占76.92%（10/13）];血清学D-screen:RHD*DⅥ.3型细胞与抗-D（克隆号P3*212 23B10）呈阳性反应,其他均为阴性的相对固定格局;RhD变异型CE表型分布比例为Ccee38.98%（23/59）、ccEe35.59%（21/59）和CcEe25.42%（15/59）。结论弱D15和部分DⅥ.3为广州地区汉族人群最常见RhD变异型类型,其中DⅥ可以通过D-screen等血清学方法得到初步鉴定,其他RhD变异型均需要分子生物学方法才能得到鉴定;>95%RhD变异型均为C+或E+表型。

• 单位
  南方医科大学; 第一临床医学院; 广州血液中心