外泌体在M1型小胶质细胞诱发神经元损伤中的作用

作者:刘文洁; 刘志林; 王红; 董瑞; 陈静燕; 单凯悦; 陈怀龙; 张高峰; 王明山*
来源:中华麻醉学杂志, 2022, 42(06): 685-689.

摘要

目的评价外泌体在M1型小胶质细胞诱发神经元损伤中的作用。方法将生长良好的BV2小胶质细胞加入脂多糖100 ng/ml和干扰素-γ 20 ng/ml诱导小胶质细胞极化为M1表型。收集M1型小胶质细胞上清液, 提取外泌体。将生长良好的N2a细胞采用随机数字表法分为4组(n=24):对照组(C组)、M1型小胶质细胞组(M组)、外泌体组(E组)和外泌体抑制剂+M1型小胶质细胞组(G+M组)。C组常规培养24 h;M组加入M1型小胶质细胞上清液培养24 h;E组加入M1型小胶质细胞源性的外泌体培养24 h;G+M组于M1型小胶质细胞加入外泌体抑制剂GW4869培养24 h后, 取上清液, 加入到N2a细胞中培养24 h。采用CCK-8法检测N2a细胞活力, 流式细胞术检测细胞凋亡率, qRT-PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达, Western blot法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果与C组比较, 其余3组细胞活力降低, 细胞凋亡率升高, Bcl-2及其mRNA表达下调, Bax及其mRNA表达上调(P<0.05);与M组比较, G+M组细胞活力升高, 细胞凋亡率下降, Bcl-2及其mRNA表达上调, Bax及其mRNA表达下调(P<0.05), E组和M组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 M1型小胶质细胞可通过外泌体介导神经元损伤。