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摘要
目的 探讨香菇多糖联合组成型活化IRF3对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 构建表达组成型活化IRF3的腺病毒载体（AdIRF3）及对照空载体（AdGFP）。增强绿色荧光蛋白（EGFP）作为示踪标记及外源抗原，分别采用感染复数（MOI）5及MOI 20感染小鼠过度表达HER2/neu蛋白克隆乳腺癌细胞系（TUBO）细胞；流式细胞荧光分选技术（FACS）检测感染效率；蛋白质印迹检测IRF3的过表达，实时荧光PCR方法检测下游目的基因干扰素β(IFNβ)、趋化因子配体（CCL）包括CCL2、CCL5、CXCL1、CXCL3、CXCL10等表达；香菇多糖联合AdIRF3处理TUBO细胞后，实时荧光PCR方法检测下游目的基因IFNβ的表达；CCK-8法检测香菇多糖对乳腺癌细胞增殖的影响；Annexin V法检测香菇多糖对乳腺癌细胞凋亡的影响。结果 IRF3可在体外过表达；IRF3可有效活化下游IFNβ、CCL2、CCL5、CXCL1、CXCL3、CXCL10等目的基因表达；采用AdIRF3 MOI20及香菇多糖100μg/mL处理TUBO细胞后，香菇多糖联合AdIRF3可促进IFNβ下游分子表达，且香菇多糖联合AdIRF3可有效抑制TUBO细胞的体外增殖和诱导TUBO细胞发生凋亡。结论组成型活化IRF3可有效活化下游信号传导通路，香菇多糖联合AdIRF3可有效抑制TUBO乳腺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，这些可能是其抑制肿瘤的原因之一。
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单位天津中医药大学第一附属医院
