羟氯喹逆转慢性髓性白血病细胞K562/IMA对伊马替尼耐药的作用机制研究

作者：杨毅; 李文燕; 盛泳佳; 王瑾; 陈启绪; 韩晨阳^*

来源：浙江医学, 2019, 41(15): 1596-1601.

• 伊马替尼
• 羟氯喹
• 慢性髓性白血病
• 细胞自噬

目的探讨羟氯喹逆转慢性髓性白血病细胞K562/IMA对伊马替尼(IMA)耐药的作用机制。方法体外培养人慢性髓性白血病细胞K562/IMA(对10μmol/L的IMA耐药),将细胞分为对照组(Con组)、IMA干预组(IMA组)、羟氯喹+IMA干预组(HCQ+IMA组),并在含相关药物的培养基中继续培养。采用CCK-8法检测细胞增殖率的变化,Annexin V-FITC/PI染色后流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,免疫荧光法染色检测细胞自噬激活标志蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ的表达,MDC染色检测细胞自噬酸性囊泡的产生,Western blot法检测细胞自噬相关蛋白p62、Beclin-1及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9的表达。结果 IMA组细胞增殖率明显高于HCQ+IMA组(P<0.05),细胞凋亡率明显低于HCQ+IMA组(P<0.05)。HCQ+IMA组细胞侵袭能力明显低于IMA组(P<0.05)。HCQ+IMA组细胞LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白表达下调,酸性囊泡形成水平降低,与IMA组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。HCQ+IMA组细胞p62蛋白表达水平高于IMA组(P<0.05),而Beclin-1蛋白表达水平低于IMA组(P<0.05),同时凋亡蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达水平高于IMA组(均P<0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达水平低于IMA组(P<0.05)。结论羟氯喹可以逆转IMA耐药CML K562细胞对IMA的敏感性,其作用机制或与抑制细胞自噬有关。

• 单位
  齐鲁工业大学