核桃JrSnRK1α1.1调控种子油脂合成与积累

作者:王贵芳; 姚元涛; 许海峰; 相昆; 梁家慧; 张淑辉; 王文茹; 张明娟; 张美勇*; 陈新*
来源:生物技术通报, 2023, 39(09): 183-191.
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2023-0043

摘要

为探讨核桃SnRK1蛋白激酶对种子油脂合成与积累的调控机理,本研究以‘香玲’核桃种仁cDNA为模板,克隆分离得到SnRK1蛋白激酶α亚基的一个编码基因JrSnRK1α1.1,其CDS序列全长为1 539 bp,编码512个氨基酸。构建植物超表达重组载体PBI121-JrSnRK1α1.1,转化并获得了超表达核桃JrSnRK1α1.1基因的拟南芥株系J-1、J-2和J-3。与野生型拟南芥相比,转基因植株表型无明显差异。采用数码显微镜对转基因拟南芥株系种子进行观察,结果显示,相对于野生型,转基因拟南芥株系的种子瘪小、表皮皱缩;株系J-1、J-2和J-3瘪小种子占比分别为43.69%、60.80%和45.87%,显著高于野生型WT(8.43%);种子的千粒重比野生型降低了27.95%-29.32%,差异显著;种子平均粒长和粒宽也显著变小;因此JrSnRK1α1.1可能参与了种子的发育进程。进一步对种子的粗脂肪含量进行测定,结果表明,与野生型相比,转基因拟南芥株系J-1、J-2和J-3的种子粗脂肪含量显著下降,分别比野生型下降9.66%、23.86%和17.61%。荧光双分子试验结果表明,核桃JrSnRK1α1.1与油脂合成关键转录因子JrWRI1互作。综上所述,超表达核桃JrSnRK1α1.1对拟南芥植株生长发育影响不明显,显著影响了拟南芥种子的发育,负调控种子油脂的合成与积累过程。

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