巨大芽孢杆菌中芥酸酰胺测定方法的建立及发酵条件优化

作者：汤鑫鑫; 谢毓丹; 肖洋; 孙冉; 李祝^*; 邓丽; 姚蒋庞

来源：生物学杂志, 2022, 39(02): 110-130.

• 芥酸酰胺
• 巨大芽孢杆菌
• 气相色谱-质谱法(GC-MS)
• 响应面法
• 发酵优化

利用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)建立巨大芽孢杆菌L2中芥酸酰胺的测定方法，采用单因素试验和响应面法对其培养基成分和发酵条件进行研究。通过Design-Expert 8.06对蛋白胨添加量、温度、pH值进行三因素响应面试验设计，以芥酸酰胺产量为响应值，最后进行响应面分析。在GC-MS色谱条件下，芥酸酰胺含量与峰面积呈现良好线性关系(R2=0.997 4),精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(RSD)均低于10%,回收率82.78%～98.14%,测得巨大芽孢杆菌发酵液样品中芥酸酰胺含量为0.940 mg/L。在葡萄糖浓度为5 g/L、蛋白胨添加量为16.40 g/L、NaCl添加量为3 g/L、接种量为2.0%、培养温度为34.8℃、摇床转速为150 r/min、初始pH值为5.80的最优培养条件下，芥酸酰胺产量为1.325 mg/L,比优化前提高了39.03%。结果可对巨大芽孢杆菌发酵液中芥酸酰胺的含量测定提供参考依据，获得芥酸酰胺产量明显提高的巨大芽孢杆菌L2发酵培养基和发酵条件，为芥酸酰胺的后续研究提供理论基础。

• 单位
  贵州省产品质量监督检验院; 生命科学学院; 贵州大学