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摘要
目的探讨磷酸化信号传导蛋白和转录激活物3(p-STAT3)在成釉细胞型颅咽管瘤(ACP)中的表达情况及其意义。方法 ACP组织标本来源于南方医科大学南方医院神经外科行手术切除的12例颅咽管瘤患者。通过苏木素-伊红(HE)染色明确ACP标本的组织学形态特征。通过免疫荧光染色方法检测p-STAT3、pan-CK、β-catenin及E-cadherin在肿瘤组织中的表达情况。原代培养ACP细胞, 设立实验组[以STAT3抑制剂隐丹参酮(5.0 mmol/L)处理]、阴性对照组(以DMSO处理)以及空白组(ACP原代细胞, 未予处理), 采用划痕实验检测细胞的迁移能力, 采用Transwell实验检测细胞的侵袭能力。设立低剂量抑制剂组(以2.5 mmol/L隐丹参酮处理)、高剂量抑制剂组(以5.0 mmol/L隐丹参酮处理)以及阴性对照组(以DMSO处理), 通过CCK-8实验检测各组细胞的增殖能力。通过蛋白质免疫印迹法检测应用隐丹参酮后上皮-间质转化相关指标(包括转录因子Slug、Twist、E-cadherin以及N-cadherin)的变化情况。结果 HE染色结果显示, 12例ACP组织中, ACP与下丘脑组织之间可形成"卯榫"样结构。免疫荧光染色结果显示, "卯榫"样结构内的涡轮状细胞中, p-STAT3呈阳性表达、pan-CK呈阴性表达、β-catenin出现核转移, 而E-cadherin的表达明显下调。划痕实验结果提示, 实验组细胞的迁移能力明显较其他两组降低[空白组、阴性对照组和实验组的迁移距离分别为(282±44)μm、(290±61)μm和(170±11)μm, P<0.05]。处理72 h后, Transwell实验结果提示, 实验组穿过Transwell小室的细胞数较其他两组更少[空白组、阴性对照组和实验组的穿膜细胞数分别为(95±14)个、(104±11)个和(57±14)个, P<0.05]。CCK-8实验结果表明, 隐丹参酮对ACP原代细胞增殖能力的抑制作用呈时间和剂量依赖性(均P<0.05)。Western blot结果显示, 利用不同浓度隐丹参酮处理ACP原代细胞后, Slug、Twist和N-cadherin的表达下降(均P<0.01), 而E-cadherin的表达升高(均P<0.001)。结论 p-STAT3可在ACP与下丘脑之间形成的"卯榫"样结构内的涡轮状胞中表达, 其介导的上皮-间质转化可能是ACP中下丘脑受累的原因, p-STAT3有可能成为治疗ACP的潜在靶点。
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