摘要

目的:建立多波长切换HPLC法同时测定五加皮多指标质量评价方法。方法:采用Waters AtlantisTMT3色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0~15 min, 10%A→20%A;15~25 min, 20%A→40%A;25~30 min, 40%A→85%A;30~45 min, 85%A),流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,检测波长为277 nm(0~30 min,检测新绿原酸、松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、异绿原酸C)、202 nm(30~45 min,检测异贝壳杉烯酸),进样量为20μL。结果:在优化的色谱条件下,新绿原酸、松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸A、异绿原酸C、异贝壳杉烯酸的质量浓度分别在1~100μg·mL-1(r=1.000)、0.5~50μg·mL-1(r=1.000)、0.25~25μg·mL-1(r=1.000)、3.75~375μg·mL-1(r=0.999 9)、0.25~25μg·mL-1(r=0.999 9)、0.25~25μg·mL-1(r=0.999 9)、0.25~25μg·mL-1(r=1.000)、2~200μg·mL-1(r=0.999 8)、0.5~50μg·mL-1(r=0.999 9)、14.45~1 445μg·mL-1(r=0.999 8)范围内均呈现良好的线性关系,精密度、重复性和稳定性的RSD均<3%,加样回收率(n=6)为90.4%~104.0%,RSD为0.4%~2.4%。11批样品中上述成分含量范围分别为0.03~0.19,0.06~0.87、0.02~0.48、0.16~4.51、0.04~0.20、0.04~0.13、0.02~0.45、0.04~3.03、0.22~1.03、5.26~21.18 mg·g-1。结论:所建立的五加皮多指标质量评价方法快速、准确,有较好的重现性和稳定性,可用于五加皮的质量评价研究。

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