阿片受体调节CaMKⅡ磷酸化在二乙酰吗啡致心肌细胞节律异常中的作用

作者：季敏; 苏丽萍; 刘丽; 管雅玲; 肖锦玲; 蒲红伟^*

来源：毒理学杂志, 2023, 37(04): 297-302.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2023.04.003

• 二乙酰吗啡
• 心肌节律异常
• 阿片受体
• CaMKⅡ

目的 探讨κ、δ和μ3种阿片受体亚型及CaMKⅡ在二乙酰吗啡致心肌节律异常过程中的作用机制。方法 取3 d龄SPF级SD大鼠乳鼠(雌雄不限)心脏进行原代心肌细胞体外培养。将培养好的原代心肌细胞分为细胞对照组、二乙酰吗啡干预组、No组(二乙酰吗啡+κ阿片受体拮抗剂组)、Nal组(二乙酰吗啡+δ阿片受体拮抗剂组)和CTOP组(二乙酰吗啡+μ阿片受体拮抗剂组),检测各组GOT、LDH活性及PLC、PI3K含量，JC-1检测各组线粒体膜电位变化，Fluo-4 AM检测各组细胞内Ca2+水平，Western blot检测p-CaMKⅡ、Calm蛋白表达情况。结果 与细胞对照组相比，二乙酰吗啡干预组GOT和LDH活性明显升高，PLC、PI3K含量明显增加，差异均具有统计学意义(F=15.165,F=38.642,F=13.482,F=18.047,P<0.05);与二乙酰吗啡干预组相比，Nal组GOT、LDH活性及PLC、PI3K含量明显降低，差异均具有统计学意义(P<0.05),No组和CTOP组LDH活性及PLC、PI3K含量无明显变化；二乙酰吗啡干预组较细胞对照组线粒体膜电位降低(F=15.843,P<0.05),Nal组较二乙酰吗啡干预组线粒体膜电位升高(P<0.05),与二乙酰吗啡干预组相比，No组和CTOP组线粒体膜电位无明显变化；Fluo-4 AM结果显示，与细胞对照组相比，二乙酰吗啡干预组细胞内[Ca2+]i明显升高，差异具有统计学意义(F=38.326,P<0.05),Nal组较二乙酰吗啡干预组细胞内[Ca2+]i明显下降，差异具有统计学意义(P<0.05),No组和CTOP组较二乙酰吗啡干预组细胞内[Ca2+]i无明显变化；Western blot结果显示，与细胞对照组相比，二乙酰吗啡干预组Calm蛋白表达水平及CaMKⅡ磷酸化水平明显升高(F=5.847,P<0.05),与二乙酰吗啡干预组相比，Nal组Calm蛋白表达水平及CaMKⅡ磷酸化水平明显降低，差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 二乙酰吗啡可损伤心肌，造成心肌细胞节律异常，其机制可能与δ阿片受体激活CaMKⅡ有关。

• 单位
  新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院; 基础医学院