摘要
目的探讨微小膜壳绦虫(H. nana)感染对美国癌症研究所(ICR)小鼠小肠中干细胞相关基因信使核糖核酸(mRNA)表达的影响。方法取野生小鼠小肠内获取的H. nana虫体于显微镜下观察其形态,同时利用保守引物,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增细胞色素C氧化酶亚基I基因(COX1)部分序列(PCOX1),并与Gen Bank中记录的H. nana的COX1参考株核苷酸序列进行同源性比对分析; 60只ICR雌鼠随机均分为实验组(灌胃H. nana虫卵500个)和对照组(灌胃等量生理盐水),灌胃处理后1~10 d分别取2组小鼠距离回盲部6~8 cm处小肠肠段,观察2组小鼠小肠组织内虫体检获情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测2组小鼠小肠组织内G蛋白偶联受体5基因(Lgr5)、多梳复合蛋白基因(Bmi1)、武藏RNA结合蛋白基因(Msi1)及淋巴细胞抗原6复合物基因(Ly6a)的mRNA相对表达量。结果野生小鼠体内获取的虫体符合H. nana的形态学特征,PCOX1基因与Gen Bank中记录的H. nana的COX1参考株核苷酸序列同源性为99%; qRT-PCR结果显示H. nana发育的似囊尾蚴阶段Lgr5和Bmi1表达上调、Ly6a表达下调(P <0.05或P <0.01),成虫阶段Lgr5和Bmi1表达下调、Ly6a上调(P <0.05或P <0.01),Msi1在虫体发育的似囊尾蚴阶段和成虫阶段表达均下调(P <0.05)。结论 H. nana感染可明显影响ICR小鼠Lgr5、Bmi1、Msi1及Ly6a基因的mRNA水平,基因表达差异主要分2个阶段,分别对应H. nana虫体发育的似囊尾蚴阶段和成虫阶段。
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单位贵州医科大学; 基础医学院