白念珠菌锌簇转录因子编码基因mrr2敲除与鉴定

作者：王影; 吕权真; 阎澜; 刘锦燕; 史册; 李文静; 项明洁

来源：诊断学理论与实践, 2015, 14(02): 164-168.

DOI：10.16150/j.1671-2870.2015.02.016

• 白念珠菌
• mrr2基因
• 基因敲除

目的:构建白念珠菌mrr2基因敲除菌株。方法 :通过长引物PCR方法及融合PCR方法,以SN152菌株基因组DNA、带有筛选标记的质粒DNA为模板构建基因敲除组件;再用高效醋酸锂转染法将敲除组件转染入SN152菌株,并在相应营养缺陷的筛选板上培养生长,再通过2次同源重组的策略敲除mrr2的2条等位基因。结果:成功构建白念珠菌mrr2基因敲除菌株。结论:融合PCR策略可高效、快速构建白念珠菌基因敲除菌株。以SN152菌株为亲本菌的mrr2基因敲除株的构建,为进一步研究白念珠菌耐药机制奠定基础。

• 单位
  上海交通大学医学院附属瑞金医院; 上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院; 中国人民解放军第二军医大学