马立克氏病病毒gB部分基因的原核表达

作者：邱亚峰; 葛菲菲; 陈溥言

来源：中国生物工程杂志, 2006, (02): 62-65+98.

DOI：10.13523/j.cb.20060213

• 马立克氏病病毒
• 原核表达
• 囊膜糖蛋白
• 表位 Marek’s disease virus Prokaryotic expression Glycoprotein Epitope

利用PCR技术扩增获得马立克氏病病毒(MDV)囊膜糖蛋白B(gB)基因部分片段,将其克隆入pET-28a载体中,获得表达载体pET-gB,将该载体转化宿主菌BL21,经1.0mmol/LIPTG诱导,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。将包涵体溶解于8mol/L的尿素中,利用His·Bind试剂盒获得纯化的蛋白,将纯化的蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,间接ELISA法测得抗体的效价为1×10-5。此外,通过Western blot实验表明,该抗体具有较高的特异性,为进一步探讨MDVgB所引起的特异的免疫反应奠定基础。

• 单位
  南京农业大学