体外诱导阿莫西林耐药株幽门螺杆菌PBP1突变位点检测

作者：曹奇志; 何利华; 宫雅楠; 张建中

来源：中国病原生物学杂志, 2015, 10(01): 6-16.

DOI：10.13350/j.cjpb.150102

• 幽门螺杆菌
• 阿莫西林
• 耐药性
• 突变
• 青霉素结合蛋白

目的分析幽门螺杆菌(Hp)阿莫西林耐药的相关分子机制。方法将Hp接种在含阿莫西林Karmali平板连续传代,诱导阿莫西林敏感菌株Hp 26695产生耐药性,获得耐药株。PCR扩增5种青霉素结合蛋白(PBPs,PBP1PBP5),2种Hop孔蛋白(HopB和HopC)和1个外排泵蛋白(HefA)的编码基因,分析耐药菌株与敏感株Hp 26695之间的基因差异。结果获得4株阿莫西林耐药菌株,其中最小抑菌浓度(MIC)为0.5和2 mg/L各1株,MIC为4mg/L 2株;对PCR扩增的基因片段进行测序和比对分析在4个耐药株的PBP1中共检出3个突变位点,2个替代突变(T438M,T593K)和1个插入突变(594G+),突变导致的氨基酸变化均位于所有耐药株PBP1的C端转肽酶结构域中。T593K和594G+是新发现的突变位点。594G+突变株的MIC为2.0mg/L。T438M和T593K突变增加了594G+突变株的耐药强度,594G+合并T438M或T593K突变株的MIC提高到4.0mg/L。结论在体外诱导的阿莫西林耐药株Hp PBP1中检测到3个突变位点,其中2个为新发现突变,Hp对阿莫西林耐药可能与PBP1的上述突变有关,但需要进一步试验验证。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 滨州医学院; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所