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摘要
目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)介导人内皮祖细胞外泌体(EPC-Exos)对高糖受损人内皮细胞生物学功能的影响。方法体外分离和培养人脐带血内皮祖细胞(EPCs);将鉴定成功的EPCs用100 mg/L的AS-Ⅳ液处理, 培养24 h后, 采用超速离心法结合超滤法提取EPCs分泌的外泌体即EPC-Exos, 采用特异性标志物CD9、CD63、CD81鉴定EPC-Exos, 透射电镜观察EPC-Exos的形态特征。同时体外分离、培养并鉴定人内皮细胞, 将鉴定成功的内皮细胞用30 mmol/L的葡萄糖预处理120 h后, 随机分为实验组(用EPC-Exos干预)和对照组(用PBS干预), 同时设置正常组(无糖培养基培养的内皮细胞)。三组细胞培养24 h后, 通过CCK-8细胞增殖检测试剂盒、细胞划痕试验、黏附能力测定试验及Matrigel体外成血管试验观察经AS-Ⅳ干预的EPC-Exos对高糖受损内皮细胞增殖、黏附、迁移和成管功能的影响。结果与正常组比较, 对照组人内皮细胞增殖、迁移、黏附及成管能力显著降低(t=24.35、6.80、10.65、9.62, P<0.05)。与对照组比较, 实验组人内皮细胞增殖、黏附、迁移及成管能力显著增强(t=30.68、5.99、5.40、8.25, P<0.05)。结论高糖受损状态下的人内皮细胞生物学功能严重受损;通过黄芪甲苷介导的EPC-Exos可显著改善高糖受损人内皮细胞的生物学功能, 具有调节糖尿病损伤内皮血管新生的潜能。
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