无镁诱导神经元惊厥样放电后Lingo-1对轴突的影响

作者：刘丽鸣; 蒋莉; 王玥; 何蓉; 陈恒胜; 程莉

来源：重庆医科大学学报, 2016, 41(08): 774-780.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.001019

• Lingo-1
• 皮层神经元
• 惊厥
• 轴突损伤
• 慢病毒感染

目的:研究惊厥样神经元模型中含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白结构域的Nogo受体作用蛋白(LRR and Ig domain containing,Nogo receptor interacting protein,Lingo-1)对神经元轴突的作用。方法:(1)培养10 d的皮层神经元,经正常细胞外液处理(正常组)或无镁细胞外液处理(无镁组)后用免疫荧光技术检测神经元轴突变化。(2)以上两种不同处理后6、12、24、48、72 h 5个时间点,用q RT-PCR及Western blot检测神经元中Lingo-1表达情况。(3)设计sh RNA慢病毒抑制Lingo-1表达,分为正常组、无镁组、无镁+对照sh RNA组和无镁+Lingo-1sh RNA组4组,用免疫荧光技术检测神经元轴突长度。结果:(1)正常组神经元轴突粗壮、轴突间网络连接较致密,神经丝蛋白200(neurofilament proteins 200,NF200)只在突起表达;无镁组神经元轴突纤细、轴突间网络连接稀疏,NF200在胞体内高表达。(2)各观察时间点上,无镁组Lingo-1的表达量均高于正常组(P<0.05)。(3)在神经元轴突长度上:无镁组小于正常组(P=0.000),无镁+对照sh RNA组与无镁组无统计学差异,无镁+Lingo-1sh RNA组大于无镁组+对照sh RNA(P=0.000)。结论:无镁处理后神经元轴突损伤、Lingo-1表达升高,抑制Lingo-1表达后神经元轴突损伤减轻,说明Lingo-1可能参与神经元放电后神经元轴突损伤。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院; 神经内科