奥普佐米协同三氧化二砷抑制急性早幼粒白血病细胞增殖的分子机制

作者：丁鑫; 姜秀星; 李志强; 雷令; 高宁^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(04): 329-355.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202109071

• 奥普佐米
• 急性早幼粒细胞白血病
• PML-RARA
• ROS
• 凋亡

目的 探讨奥普佐米协同三氧化二砷抑制急性早幼粒白血病细胞增殖分子机制。方法 MTT法检测不同联合用药对急性早幼粒白血病NB4、HL-60细胞存活率的影响：(1)梯度浓度三氧化二砷(NB4细胞：0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μmol/L;HL-60细胞：0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0μmol/L)单用或与固定浓度奥普佐米(NB4细胞：40 nmol/L;HL-60细胞：160 nmol/L)联用；(2)梯度浓度奥普佐米(NB4细胞：0、5、10、20、40 nmol/L;HL-60细胞：0、40、80、120、160、200 nmol/L)单用或与固定浓度三氧化二砷(NB4细胞：0.4μmol/L;HL-60细胞：1.2μmol/L)联用；(3)单独或联合用药作用不同时间(12、24、48 h);(4)相同浓度的硼替佐米或奥普佐米分别与梯度浓度三氧化二砷联用。单独用药或联合用药或用NAC预处理后，流式细胞仪检测细胞凋亡及ROS生成量；Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved-Caspase 3、cleaved-Caspase 9、PARP-1及融合基因蛋白PML-RARA的表达。结果 与单用组比较，奥普佐米与三氧化二砷联用后，NB4、HL-60细胞存活率显著降低(P<0.01),呈剂量和时间依赖性，并具有明显的协同作用，协同系数小于1。联合用药可使约80%的NB4细胞ROS水平明显升高，融合蛋白PML-RARA表达降低，细胞凋亡率增加约70%(P<0.01);与联合用药组比较，ROS抑制剂NAC预处理后，细胞凋亡减少约41%(P<0.01),PML-RARA的表达升高。结论 奥普佐米协同三氧化二砷诱导急性早幼粒白血病细胞ROS生成，并导致PML-RARA蛋白表达降低，促进细胞凋亡。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 第三军医大学