葡萄VvWRKY26基因克隆与表达分析

作者:张国蓉; 梁长梅; 郭建勇; 张泽宁; 张鹏飞; 赵旗峰; 梁晋军*; 温鹏飞*
来源:农业生物技术学报, 2023, 31(03): 475-487.

摘要

WRKY家族广泛参与植物的生长发育、调节物质代谢和响应环境信号等过程。为了解葡萄(Vitis vinifera) VvWRKY26基因的功能,本研究以’无核早红’(’WuHeZaoHong’)葡萄为材料,采用同源序列法克隆了VvWRKY26基因(GenBank No. KX823961.1),并对其进行了生物信息学、时空表达及水杨酸(salicylic acid, SA)响应表达分析。生物信息学分析表明,VvWRKY26的CDS区长为1 434 bp,编码477个氨基酸,无规则卷曲、α-螺旋及β-折叠构成其二级结构,为非分泌、非跨膜、分布于核内的蛋白;与矮牵牛(Petunia hybrida) PhPH3 (GenBank No. AMR43368.1)、油菜透明种皮2 (Brassica napus transparent testa glabra 2, BnTTG2)(GenBank No. 106423067)和拟南芥(Arabidopsis thaliana) AtTTG2 (GenBank No. 818303)高度同源,属于第Ⅰ类WRKY转录因子家族。启动子顺式作用元件分析表明,VvWRKY26启动子具有光信号、抵御活性氧胁迫、SA和赤霉素(gibberellin acid, GA)信号等响应元件。荧光定量PCR结果表明,VvWRKY26在花、茎、芽、卷须、幼叶、成熟叶和果实组织中均有表达,在幼果期和转色期表达量较高;SA处理后0.5~8 h表达量均显著高于对照(P<0.05)。本研究为后续研究VvWRKY26在SA信号转导中的作用提供理论依据。