血红素氧合酶1对肺上皮细胞自噬和凋亡的影响及机制

作者：鲁清辰; 赵双平; 李静

来源：临床和实验医学杂志, 2018, 17(03): 251-255.

• 血红素氧合酶1
• A549细胞
• 自噬
• 凋亡
• PI3K

目的探讨血红素氧合酶1(HO-1)对肺泡上皮细胞自噬和凋亡的影响及机制。方法采用前瞻性研究体外培养人源肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,利用体外设计合成的小分子RNA(siRNA)沉默A549细胞HO-1基因的表达。实验分为:对照组(Control组)、siRNA-Con空载组(Con组)、HO-1 siRNA沉默组(siRNA组)。Control组不作任何处理,Con组和HO-1 siRNA组分别转染siRNA-Con和HO-1 siRNA 48 h后取样本检测。采用荧光定量PCR(QT PCR)检测HO-1 mRNA水平;采用Western Blot法检测HO-1、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、微管相关蛋白轻链3B(LC-3B)蛋白的表达变化;采用免疫荧光结合荧光显微镜观察各组细胞内HO-1和LC3B表达定位;采用JC-1结合流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位情况。结果与Control组相比,Con组HO-1、LC3B、PI3K蛋白表达,JC-1单体所占比率差异无统计意义(P>0.05);与Con组相比,HO-1 siRNA组细胞HO-1、LC-3B、PI3K蛋白表达明显下降(P<0.05);HO-1 siRNA组JC-1单体所占百分比升高,早期凋亡细胞增多(P<0.01)。结论血红素氧合酶1有介导细胞自噬、下调细胞凋亡的作用,该调节作用可能与PI3K信号通路有关。

• 单位
  中南大学湘雅医院