摘要
目的探讨前列腺六次跨膜蛋白(STEAP3)对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及机制。方法构建稳定干扰表达STEAP3的肝癌细胞株7721-shS TEAP3、QGY-shS TEAP3(干扰组),及其对照细胞株7721-VECTOR、QGY-VECTOR(对照组)。采用RT-PCR检测STEAP3 m RNA的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达。实验数据比较采用t检验。结果成功构建稳定干扰表达STEAP3的肝癌细胞株,干扰组7721-sh STEAP3和QGY-shS TEAP3细胞的STEAP3 mR NA表达量分别为(5.10±0.70)×10~(-3)和(0.09±0.02)×10~(-3),明显低于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞的(7.80±0.07)×10~(-3)和(7.00±0.21)×10-(3t=-9.60,-57.16;P<0.05)。细胞生长曲线显示干扰组7721-shS TEAP3和QGY-shS TEAP3细胞的增殖能力明显强于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞。细胞周期检测结果显示干扰组7721-shS TEAP3和QGY-sh STEAP3细胞的G_0/G_1期分别为(55.23±0.51)%、(57.38±0.78)%,明显低于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞的(68.25±0.28)%、(77.55±0.89)%(t=-7.83,-27.39;P<0.05)。干扰组7721-sh STEAP3和QGY-sh STEAP3细胞的细胞周期蛋白(cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)4蛋白表达水平分别为0.730±0.017、1.090±0.028和0.780±0.063、1.310±0.031,明显高于对照组7721-VECTOR和QGY-VECTOR细胞的0.660±0.059、0.780±0.085和0.530±0.014、0.920±0.024(t=4.47,6.87和12.33,4.89;P<0.05)。结论 STEAP3具有抑制肝癌细胞增殖能力的作用,其机制可能与G_1期细胞周期阻滞有关。
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