长角血蜱4D8基因的克隆与原核表达

作者：罗金; 刘光远; 田占成; 谢俊仁; 沈辉; 田美媛

来源：中国兽医科学, 2012, (06): 551-556.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2012.06.009

• 长角血蜱
• 4D8基因
• 克隆
• 原核表达 Haemaphysalis longicornis
• 4D8gene
• cloning
• prokaryotic expression

根据GenBank上登录的蜱4D8基因序列设计引物,用PCR技术从长角血蜱雌蜱研磨组织cDNA中扩增出4D8基因,将其连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T-4D8,并对检测为阳性的克隆进行测序。将该基因重组至原核表达载体pGEX-4T-1,经表达纯化后,进行Western-blot试验鉴定其生物学活性。结果,长角血蜱4D8基因的氨基酸序列与青海血蜱、肩突硬蜱的同源性分别为90%、81%。表达的重组蛋白是分子质量约为41ku的融合蛋白。Western-blot试验证明,该重组蛋白能很好地识别兔抗长角血蜱全蜱阳性血清。结果表明,4D8基因作为一种重要的分子标记基因在蜱的流行...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所