miR-194a介导饲料维生素D_3调节黄颡鱼JAK-STAT免疫通路的研究

作者：马春松; 程珂; 郭勋; 王春芳

来源：水生生物学报, 2022, 1-14.

• 维生素D3
• miR-194a
• JAK-STAT信号通路
• 免疫应答

为了研究miRNA如何介导饲料维生素D3在黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）JAK-STAT通路中调节免疫应答的机制,选择黄颡鱼幼鱼为主要研究对象,设计了三组维生素D3浓度分别为1120、3950和16600 IU/kg的饲料,开展了为期12周养殖实验,养殖实验结束后进行鮰爱德华氏菌（Edwardsiella ictaluri）攻毒实验。对攻毒后的头肾和脾脏组织进行Illumina高通量测序,筛选差异表达的miRNAs,并对差异表达miRNAs进行靶基因的生物信息学预测和富集分析,发现miR-194a的靶基因富集在JAK-STAT信号通路中;进一步通过双荧光素酶报告基因实验验证了miR-194a对靶基因jak2a和tyk2具有靶向性调控的关系,能够发挥对jak2a和tyk2的抑制作用;通过体外巨噬细胞实验,在细胞中同样检测到miR-194a可以响应培养基中不同浓度的活性维生素D3,并对靶基因jak2a与tyk2同样发挥抑制作用;通过进一步对靶基因在JAK-STAT通路中的下游基因表达检测,发现随着JAK-STAT信号通路的激活,抗炎症反应（AIR）因子及被其诱导激活的靶基因的表达量随着培养基中维生素D3浓度升高呈现上升趋势（P＜0.05）,炎症通路NF-κB通路被抑制（P＜0.05）,促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α等表达量显著下降（P＜0.05）,并且调节了巨噬细胞由M1型极化向M2型极化的转变（P＜0.05）。研究结果发现miR-194a能在体内体外实验中响应维生素D3的变化,维生素D3通过促进miR-194a的表达,负调控靶基因jak2a和tyk2,并对JAK-STAT通路中的下游基因发挥间接作用,阐释了miR-194a介导饲料维生素D3通过JAK-STAT信号通路调控黄颡鱼免疫应答的机制。

• 单位
  华中农业大学