超甜玉米转基因稳定高效再生体系的建立及转化植株PCR分析

作者：李余良; 胡建广; 苏菁; 刘建华

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2007, 35(3): 70-74.

DOI：10.3321/j.issn:1671-9387.2007.03.016

• 超甜玉米
• 转基因
• 幼胚
• 植株再生
• 再生体系
• PCR分析

为了通过对影响超甜玉米再生因素的研究,建立超甜玉米转基因再生技术体系,获得抗虫资源.以超甜玉米幼胚为愈伤组织诱导外植体,利用基因枪法将苏云金杆菌杀虫蛋白基因转化胚性愈伤组织,通过优化再生和生根培养条件建立了稳定、高效的超甜玉米转基因再生成株体系.结果表明,随着愈伤组织继代时间的延长,再生成苗率降低,再生成苗越难;除草剂Basta对愈伤组织筛选的最适质量浓度为8 mg/L,愈伤组织预分化的最适培养基为MS+40 g/L蔗糖+20 g/L甘露醇+5.0 mg/L ABA,最适的再生培养基为MS+20 g/L蔗糖+2.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA,生根培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA,对生根不好的小苗附加0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L IBA或0.2 mg/L NAA+3.0 mg/L IBA可以促进生根,生根率达93%以上.对部分再生转化植株进行PCR分析,部分植株能够扩增出426 bp片段,与阳性对照大小相同.试验结果初步证明Bt基因已经导入到玉米植株中.

• 单位
  中山大学; 生命科学学院; 广东省农业科学院